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技術(shù)文章

紫外分析儀的原理以及校準的重要性說明

2021-08-09

技術(shù)文章

紫外分析儀采用不同波長的紫外光對DNA、RNA電泳凝膠樣品進行觀察拍照、檢測蛋白質(zhì)、核甘酸，也可以同時發(fā)出長波紫外線、短波紫外線和可見光三種波長的光輻射。紫外分析儀適用于核酸電泳、熒光的分析、檢測，PCR產(chǎn)物檢測，DNA指紋圖譜分析，紙層分析，薄層分析，是開展RFLP研究，RAPD產(chǎn)物分析的理想儀器。

工作原理：

普通處于基態(tài)的物質(zhì)分子受到激發(fā)光(即紫外線)照射后，吸收了激發(fā)的能量，物質(zhì)分子處于激發(fā)狀態(tài)。激發(fā)態(tài)分子的能量一部分消耗于振動，于是分子處于振動能級，從振動能級回到基態(tài)時多余的能量依其它的形式放出來即為熒光，而不同物質(zhì)能發(fā)出不同波長的熒光，人們可以根據(jù)不同光色的熒光和熒光的強弱來判斷不同的物質(zhì)和含量多少，這就是熒光分析。

紫外分析儀校準的重要性：

1、根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計，絕大多數(shù)廠商生產(chǎn)的紫外分析儀技術(shù)指標中都規(guī)定紫外線波長為254nm和365nm(或者其他紫外波長)。紫外分析儀主要應(yīng)用于熒光物質(zhì)的檢測，通過查閱相關(guān)熒光物質(zhì)測量的國家標準，都規(guī)定了使用設(shè)備和波長，波長的偏差直接影響結(jié)果的判定。因此波長應(yīng)作為一個重要的指標校準。

2、紫外燈強度隨使用時間的增加而衰減，而紫外輻射照度值的衰減決定了用戶是否需要更換燈，因此此項校準十分必要。

3、燈的穩(wěn)定性作為一個重要的技術(shù)指標直接影響到用戶對樣品的檢測結(jié)果，因此，燈的穩(wěn)定性測量應(yīng)作為校準項目。